La Chromatographie

au sommet du pic.

Ve = Vm + K * Vs

Vm = Volume mort.

K = Coefficient de distribution (de partage) du composé entre la phase stationnaire et la phase mobile.

Vs = Volume total de la phase stationnaire.

Le temps de rétention est le temps pendant lequel la molécule est retenue par la phase stationnaire.

Plus le soluté à tendance à ce placer dans la phase stationnaire (de ce fait moins présent dans la phase mobile) plus le coefficient K sera grand.

CS = Concentration du soluté dans la phase stationnaire.

CM = Concentration du soluté dans la phase mobile.

Le facteur de capacité K' tient compte du volume mort. Il rend compte de la "capacité" de la colonne à retenir un composé :

K' = (Ve - Vm) / Vm

Quand on veut comparer deux solutés, on définit un coefficient de sélectivité. C’est un paramètre qui va permettre d’évaluer la séparation de deux molécules différentes en tenant compte du volume d’élution d’une molécule 1 et du volume d’élution d’une molécule 2.

α = (Ve 2 – Vm) / (Ve 1 – Vm) = tr’2 / tr’1 = K’2 / k’1

tr’ = Temps de rétention réduit (tr = tr’ + tm).

K’ = Facteur de capacité.

α rend compte de l'efficacité de la séparation de deux pics voisins. Si α = 1, cela indique que les structures des composés analysés sont trop proches pour permettre leur séparation effective dans le système utilisé. La valeur minimale acceptable de α est 1,1. En dessous, il vaut mieux changer d'éluant ou de phase stationnaire. Il ne permet pas de savoir à lui seul si la séparation est réellement possible, mais plus α est élevé, plus la séparation est facile.

La résolution correspond à une grandeur numérique caractérisant l'aptitude du système chromatographique à séparer 2 composés d'un mélange.

R = (Ve 2 – Ve 1) / [½ (Wb1+ Wb2)]

R = Coefficient de résolution de deux pics.

Wb = Largeur du pic à la base.

Si R