Tp Microbiologie

s de bulle.

B.Cereus : Catalase positive, des bulles se forment car réaction avec eau oxygénée.

d) Boite de pétri T.S.C. :

Pour catalase négative.

Au préalable une suspension de 5ml ensemencé avec Clostridium a été préparée. Ces 5ml ont été déposé au centre de la boite de pétri avant d’y couler le milieu T.S.C.

A priori les 5ml se sont étalés dans la boite car on observe quelques gros points noirs et pleins de petits points car très nombreux.

Avant de repiquer B.Cereus dans boite de Pétri Mossel et Colombien, nous l’avons ensemencé dans un petit tube à émolyse en eau stérile.

e) Boite Pétri Colombien :

Cereus : utilise hématies du sang, zone claire et grande. Hémolyse importante appelée Béta hémolitique car grande zone éclaircissement.

* Hémolyse +

Clostridium : Le milieu marron de base n’a pas changé de couleur. Pas d’enzyme lui permettant d’utiliser le sang.

* Hémolyse –

f) Boite pétri Mossel :

Utilisée pour catalase Positive.

Bacillus subtilis : Le milieu rouge de base est passé au jaune car la souche a acidifié le milieu car utilisation du manitol.

* Manitol+

Cereus : Le milieu marron de base a viré au rose, et auréole colonies blanchâtre et précipité.

Pas d’acidification du milieu donc utilise le glucose. Utilise le jaune d’œuf donc produit de la lécithine.

* Manitol –

g) Boites Pétri milieu gélosé :

Cereus : utilise tout l’espace, elle s’est étendue et sa couleur est jaunâtre.

Clostridium : Rien car anaérobie stricte.

h) Coloration de GRAM :

Les bactéries observées étaient Gram positif, la paroi constitue une barrière imperméable à l'alcool et le cytoplasme demeure coloré en violet.

Conclusion :

Grâce à ce TP nous avons pu étudié les principaux caractères de deux souches :

Bacillus et clostridium.

Grâce aux milieux d’identification mis à disposition, les principaux critères d’identification ont été étudiés.

La Clef d’identification a été réalisée sur ces 2 espèces.